Valoracion De Endotoxinas Bacterianas En Sueros Antiofidicos De Origen Equino: Optimizacion De Metodos En El Control De La Calidad
Resumen del Libro
Se valoro la presencia de pirogenos en el antisuero contra venenos de serpientes de los generos Bothrops, Crotalus y Lachesis elaborado por la planta de produccion de sueros antiofidico del Instituto Nacional de Salud en Bogota Colombia. Se evaluo materia prima, proceso y producto terminado utilizando las tecnicas de pirogenos en conejos USP y limulus amebocito lisado (LAL). Los resultados por los dos metodos de analisis para los cinco lotes de materia prima fueron negativos a pirogenos y positivos para los ocho lotes analizados de producto terminado en los que se determino por LAL niveles de endotoxina entre>13.87 UE/ml y> 24.7 UE/ml, superiores al permitido por la Farmacopea Americana USP XXIII, que fija un valor maximo de 1.67 UE/ml para este tipo de producto. Se estandarizo el uso de la tecnica del LAL en el suero de origen equino utilizado como materia prima, el cual presenta inhibidores naturales para la tecnica, mediante pretratamientos al plasma para la extraccion de inhibidores aplicando diferente tecnicas, con los siguientes resultados de mayor a menor capacidad de deteccion de endotoxina: tecnica de sulfato de amonio hasta 0.125 UE/ml, tecnica de dilucion calor 0.21 UE/ml, tecnica de cloroformo dilucion 0.42 UE/ml y la tecnica con ajuste de pH no detecto endotoxina en la muestra. Se valoro la potencializacion de las muestras sometidas a extraccion, con la adicion de iones mono y divalentes. Se ensayaron los iones NaCl, MnCl, CaCl subindice 2 y MgCl subindice 2, en concentraciones de 0.02, 0.05, 0.08M. El mejor resultado se obtuvo con los iones MgCl subindice 2 y CaCl subindice 2 a 0.05M, asociado a la tecnica de extraccion de cloroformo y dilucion, en la que aumento la deteccion de endotoxina de 0.42 a 0.125 UE/ml con MgCl subindice 2 y de 0.42 a 0.35 UE/ml con CaCl subindice 2. Se concluyo que la tecnica del LAL ajustada con la tecnica sulfato de amonio y calor y la adicion MgCL subindice 2 a 0.05M, sirve como prueba de control para ser aplicada a la…
